Nella ricerca biologica, vengono generalmente utilizzati i polipeptidi con una lunga sequenza. Per i peptidi con oltre 60 aminoacidi nella sequenza, l'espressione genica e la SDS-PAGE sono generalmente usati per ottenerli. Tuttavia, questo metodo richiede molto tempo e l'effetto di separazione del prodotto finale non è buono.
Sfide e soluzioni per la sintesi di peptidi lunghi
Nella sintesi di peptidi lunghi, siamo sempre di fronte a un problema, cioè il ostacolo sterico della reazione di condensazione aumenta con l'aumento della sequenza nella sintesi e il tempo di reazione deve essere regolato per far completare la reazione. Tuttavia, più tempo è il tempo di reazione, più effetti collaterali vengono prodotti e si forma una parte del peptide bersaglio. Tali residui - catene peptidiche carenti sono impurità chiave prodotte nella sintesi di peptidi lunghi. Pertanto, nella sintesi di peptide lungo, il problema chiave che dobbiamo superare è esplorare le condizioni di reazione di alta qualità e i metodi di reazione, in modo da rendere la reazione di condensazione degli aminoacidi più completa e piena. Inoltre, ridurre i tempi di reazione, perché più tempo di reazione, più reazioni laterali incontrollabili, più complessi sono i sottoprodotti. Pertanto, i seguenti tre punti sono riassunti:
È possibile utilizzare la sintesi a microonde: Per alcuni aminoacidi riscontrati nel processo di sintesi che non sono facili da integrare, è possibile utilizzare la sintesi a microonde. Questo metodo ha risultati notevoli e riduce notevolmente il tempo di reazione e riduce la formazione di due sottoprodotti chiave.
È possibile utilizzare il metodo di sintesi di frammenti: Quando alcuni peptidi sono difficili da sintetizzare con metodi di sintesi comuni e non facili da purificare, possiamo adottare l'intera condensazione di diversi aminoacidi in un certo segmento del peptide nella catena del peptide nel suo insieme. Questo metodo può anche risolvere molti problemi nella sintesi.
È possibile utilizzare la sintesi dell'acilidrazide: La sintesi dell'acilidrazide di peptidi è un metodo di sintesi in fase solida del peptide Cys N-terminale e della reazione selettiva chimica del polipeptide c-terminale C tra la formazione di legami ammidici per raggiungere il metodo di legame peptidico. Sulla base della posizione di CYS nella catena peptidica, questo metodo divide l'intera catena peptidica in più sequenze e le sintetizza rispettivamente. Infine, il peptide bersaglio viene ottenuto attraverso la reazione di condensa in fase liquida. Questo metodo non solo riduce notevolmente il tempo di sintesi del lungo peptide, ma aumenta anche significativamente la purezza del prodotto finale.
Purificazione del peptide lungo
La particolarità dei peptidi lunghi porta inevitabilmente a componenti complessi di peptidi grezzi. Pertanto, è anche una sfida purificare i peptidi lunghi da parte di HPLC. Serie amiloide di processo di purificazione del polipeptide, assorbendo molta esperienza e utilizzata con successo nella purificazione del peptide lungo. Adottando nuove attrezzature, miscelazione di più sistemi di purificazione, separazione ripetuta e altri metodi di esperienza, il tasso di successo della lunga purificazione dei peptidi è stato notevolmente migliorato.
Tempo post: 2025-07-03